辛辛苦苦做完转化，满心欢喜去涂板，结果第二天掀开培养皿——菌落挤成“菌饼”，连单菌落都找不到，当场社死！

为什么会糊？先找凶手！

1️⃣ 细胞太挤了！
转化效率高不是错，但细胞浓度过高就像春运地铁，菌菌们贴贴到窒息。感受态太优秀、质粒太多、热激太久都会让细胞量爆表。

2️⃣ 涂布手法翻车！
涂布棒没灭菌干净or用力过猛，菌液直接被“抹匀”成菌泥，还混进杂菌开party。

3️⃣ 培养基“拉胯”！
琼脂不够=培养基软塌塌，菌体一游就糊；营养失衡还会让菌菌疯长失控。

4️⃣ 环境太卷了！
37℃多1℃菌菌代谢起飞；培养时间太长，菌落直接叠罗汉。

3步急救术，糊板秒变艺术！

Step1：稀释！稀释！稀释！

重要的事说三遍！取100μL菌液+900μL无菌生理盐水，先10倍稀释试试水。还糊？继续100倍、1000倍，直到菌落像满天星。
小tip：高转化效率（电转/超感受态）直接1000倍起跳！

Step2：涂布手法升级！

酒精灯烧红涂布棒→冷却10秒→“Z”字形轻柔涂开，像给蛋糕抹奶油！面积不够？直接换大皿，让菌菌住“豪宅”！
小tip：涂完静置10分钟再进培养箱，减少菌液流动！

Step3：培养基&环境大检查！

琼脂称量精准到0.1g，灭菌后摇匀防分层。培养箱温度用温度计实测（别信显示屏！），12-18小时就盯盘，避免菌菌开演唱会！

彩蛋：超实用小剧场

场景1：菌落太密但不想稀释？直接牙签蘸菌液→在新板划“之”字线，单菌落get场景2：赶时间？稀释好的菌液滴5μL在板边，自然扩散成“菌环”，拍照绝美

最后叮嘱

• 每次实验留一个“不稀释”对照，直观感受浓度差

• 培养皿底部贴标签，防混样社死现场！

• 遇到顽固“糊板”，换新鲜制备的感受态，旧细胞可能“内卷”过度