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试剂配错全白做!零翻车秘籍

试剂配错全白做!零翻车秘籍

Tue Jul 22 00:00:00 CST 2025毕合生物|MBC新闻编辑

辛辛苦苦养细胞,结果因为一瓶PBS配错浓度,实验直接重开!从称量到定容全程高能!



Step1 实验前灵魂三问

你要配啥? 浓度算对了吗?别手抖多写一个0!

试剂过期没?易潮解的NaOH结块=浓度直接漂移

工具干净吗? 天平托盘残留上一瓶试剂=灾难现场

Step2 称量像拆盲盒

固体试剂用称量纸or小烧杯,易吸湿的NaOH、CaCl₂建议现取现称
液体用量筒or移液枪,视线与凹液面最低点平齐,
读数时屏住呼吸避免手抖!
称量完立刻盖紧试剂瓶盖,防止“空气偷走”你的纯度~

Step3 溶解有节奏

难溶固体先加少量溶剂润湿成糊状再补满,Na₂HPO₄直接加整瓶水会结块到怀疑人生!

有机试剂用玻璃棒引流,DMF、DMSO这些“皮肤刺客”记得戴双层手套

热敏感试剂(如酶类)用冰浴+磁力搅拌,温度超过25℃活性直接腰斩

Step4 定容仪式感拉满

容量瓶使用法则:先加2/3溶剂→摇匀→补液至刻度线→倒转摇匀10次→静置观察是否挂壁

缓冲液校准:pH计用标准液三点校准后再测,调pH时NaOH/HCl要逐滴加,每滴间隔5秒

易挥发试剂:定容后立刻盖紧塞子,贴标签时顺便写上开封日期,防止“挥发魔法”

Step5 标签是救命符

手写标签防水笔+透明胶带双重保险,内容必须包含:试剂名称、浓度、配制人、日期、储存条件
血泪教训:曾经有人把10%SDS写成1%,结果跑胶时蛋白直接原地解散

彩蛋:特殊试剂隐藏关卡

SDS-PAGE胶:APS现配现用,TEMED用棕色瓶避光,过期TEMED会让胶不凝固

细胞培养液:血清解冻后轻柔颠倒混匀,避免剧烈摇晃产生泡沫影响细胞生长

荧光染料:FITC、Rhodamine这类见光死选手,全程避光操作+锡纸包裹保存

翻车现场急救包

浓度配高了? 用溶剂稀释后重新定容,千万别直接倒掉!

pH偏酸/碱? 用弱酸弱碱微调,强酸强碱容易破坏缓冲体系

试剂变色? 立即停用!可能是污染或分解,重新配制才是正道